野菊花雾化有什么作用?
野菊花,为菊科植物野菊的头状花序。别名甘菊、滁菊、徽菊等,是我国传统的常用中药材之一,主要分布于华北、华东和西北等地,在山西、安徽、浙江等地栽培较多。性味甘苦,微寒。归肺、肝经。具有疏风清热,解毒明目之功效。现代药理研究表明,野菊花所含的皂甙、黄酮类等成分对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌等有抑制作用;能显著降低血清胆碱酶水平而减轻肝损伤,还可增加心肌营养性血流量,降低心脏紧张频率及心肌耗氧量,具有强心、降压、抗心率失常的作用[1-3]。临床上常用于疔疮肿毒、皮肤瘙痒、咽喉肿痛、头痛、目赤等病症的治疗,是“凉茶”的主要成分之一,也是现代中药保护品种之一。 近年来,随着化学药物毒副作用的逐渐显现以及人们健康意识的不断提高,人们对天然药物的需求日益增强。开发利用资源优势,研究探讨野菊花的新用途具有重要的现实意义。
目前,关于野菊花临床应用的研究报道较多,而对其有效成分及作用机制的研究也有诸多报道。但在利用野菊花雾化治疗呼吸道疾病方面未见有文献报道。本实验拟通过建立大鼠慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型,观察野菊花雾化治疗对COPD大鼠肺功能及肺组织病理学的影响,以期为临床合理应用该药提供实验依据。
1材料与方法 实验动物 SPF级雄性SD大鼠40只,体质量250~300 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,许可证号SCXK(京)2013—0001。动物在实验期间常规饲养,室温控制在(22±3)℃,相对湿度60%~70%,照明时间12 h/d,自由摄食与饮水。
给药方法 大鼠适应性喂养1周后,按体质量随机分层分组,每组10只。共4组,分别为正常对照组、模型对照组、孟鲁司特钠组和野菊花雾化剂组。除正常对照组外,其余各组大鼠参照Jalali等方法建立COPD模型。建模后第8天开始给药干预,每日测呼吸强度(潮气量和呼吸总量)二次,记录并计算呼吸阻抗(R)。至第12天,各组大鼠再次称重,处死动物,立即取出肺脏,浸入液氮速冻,置于-80℃冰箱中冷冻保存。
试剂与仪器 N-溴代丁二酰亚胺(NBSI)、氢氧化钠、无水乙醇等均为分析纯,购于国药集团化学试剂有限公司。MilliQ超纯水机(美国密理博公司生产);SCHOLZ多功能生物电位计(德国Scholz公司生产);AE-250电子天平(瑞士Mettler Toledo公司生产);RE 52A旋转蒸发器(上海亚辉生物科技有限公司);TSL-6型细胞培养箱和TSL-2020型生物安全柜(北京泰斯瑞德科技有限公司)。
测定指标与方法 一般情况观察:每天观察记录大鼠的一般情况,包括活动度、进食量、毛色、精神状态等。 肺通气功能检测:采用SCHOLZ多功能生物电位计测量大鼠的瞬时通气能力(TVE)和最大通气量(MVV),每个数值均重复测定3次,取平均值。 血液气体分析:取大鼠静脉血液50μl,采用美国贝昂DxC800全自动生化分析仪测定血液二氧化碳(CO2)结合力和动脉血氧分压(PaO2)。 丙二醛(MDA)含量的测定:采用硫代巴比妥酸(TBA)法 [6], 具体步骤参照试剂盒说明书进行操作。
肺组织病理学检查:取一部分冷冻干燥的肺组织,采用甲醛溶液固定,石蜡切片,HE染色,光镜下观察。同时选取不同视野,采用Image-Pro Plus图像处理系统测定每例肺组织的肺泡数、纤维间隔长度,并按下列公式分别计算出平均肺泡数和平均纤维间隔长度。 平均肺泡数=0.947×(总肺泡数-500)/(体质量平方根)+500 平均纤维间隔长度=(所有纤维间隔长度总和)/(总肺泡数-500) 主要统计学方法 数据以x±s表示,采用SPSS 13.0软件包进行单因素方差分析和q检验。 P<0.05认为差异具有统计学意义。
结果 一般情况 建模后第2天,各实验组大鼠出现咳嗽、喘气等呼吸道症状,其中以孟鲁司特钠组和野菊花组为重;第3天开始出现趴卧、精神欠佳、食欲下降等症状,部分大鼠死亡;第4天,存活的实验动物呼吸道症状明显,呈持续性;上述症状逐渐缓解,第8天后基本恢复正常。
肺通气功能测定 与正常对照组比较,模型对照组TVE和MVV均明显下降(P<0.01)。 与模型对照组比较,孟鲁司特钠组和野菊花雾化组TVE和MVV明显改善(P<0.01或P<0.05),但后者优于前者。见表1。
血气分析及MDA含量测定 与正常对照组比较,模型组血浆中Ca2+浓度无明显变化,PH值有所降低,CO2和H+含量显著升高(P<0.01);血浆中MDA含量明显增高(P<0.01)。
与模型对照组相比,经治疗后,孟鲁司特钠组和野菊花喷雾组Ca2+浓度、CO2和H+含量恢复到接近正常水平,PH值升高,MDA含量降低(P<0.01或P>0.05)。 野菊花雾化组的疗效优于孟鲁司特钠组,但两组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)
肺组织学检查结果 光镜检查可见,正常对照组肺泡结构清晰,分布