艾滋病一个月能查出来吗?
目前临床检验方法可以检测HIV-1/2感染相关抗原和抗体,但各阶段感染者体内病毒及其代谢产物含量较低,导致检测信号弱且不稳定,容易造成漏检、假阳等情况[1]。 因此,提高抗体检测敏感性是降低HIV诊断漏诊率的有效途径之一。 目前临床上常用HIV抗体检测试剂有酶标免疫法(EIA)、化学发光免疫分析技术及胶体金快速检测技术等。与上述传统方法相比,核酸扩增技术具有灵敏度高、特异性和可靠性高的特点,已成为一种新的疾病筛查、诊断及监测手段[2,3]。其中,逆转录PCR技术由于特异性强、灵敏性高等优势被广泛应用于艾滋病的诊断中。
基于反转录聚合酶链式反应技术的HIV核酸检测原理如下所述:HIV侵入人体细胞后,利用宿主细胞的原料合成自身核酸并转录为RNA,该过程不受宿主细胞基因突变影响;在逆转录酶的作用下,病毒RNA可转变为DNA单链;然后通过DNA复制机制产生双链DNA分子,这一过程中会出现基因组和亚基因组DNA;随后将得到的DNA转入到逆转录酶以及RNA聚合酶作用下形成cDNA;最后使用引物对cDNA进行PCR扩增即可获得目的片段。
然而,PCR实验存在诸多限制因素,包括退火温度难以控制、模板量低、抑制物质干扰等原因都会引起假阴性结果的出现。为了解决这些问题,研究人员尝试在不同方面进行优化处理——例如使用多重PCR、实时荧光定量PCR等方法,或借助高通量的测序平台实现大规模样本的自动化检测,从而大大提升了检测结果的准确性和可靠性。